大量的證據(jù)表明，miRNA表達(dá)的失調(diào)是一些**過程(包括許多癌癥)的起因或指示劑。研究還發(fā)現(xiàn)血清和血漿中可以檢測到循環(huán)miRNA，且它們的表達(dá)因**而異，這一發(fā)現(xiàn)說明循環(huán)miRNA的表達(dá)特征可作為**診斷和預(yù)防的生物標(biāo)志物，具有巨大潛力。
miRNA研究的成功依賴于高性能工具和技術(shù)的使用。Qiagen是一個一站式供應(yīng)商，滿足您在miRNA純化、定量和功能鑒定上的所有需求。歡迎訪問QIAGEN的GeneGlobe? 網(wǎng)頁(www.qiagen.com/GeneGlobe)，訂購miRNA特異的產(chǎn)品，并發(fā)現(xiàn)大量寶貴的基因信息、通路信息和生物信息學(xué)工具。
QIAgen提供了以下方案：
一、miRNA純化
利用miRNeasy Kits和PAXGENE? Kits純化高質(zhì)量總RNA，包括miRNA。
二、miRNA表達(dá)譜分析
利用miScript? miRNA PCR Arrays快速分析整個miRNA組(miRNome)或通路聚焦的miRNA分析板
三、miRNA生物發(fā)生和調(diào)控研究
利用miScript PCR System同時定量成熟的miRNA(聯(lián)合miScript Primer Assays)、前體miRNA(聯(lián)合miScript Precursor Assays)和mRNA目標(biāo)(聯(lián)合QuantiTect? Primer Assays)。
四、miRNA功能分析
利用miScript miRNA Mimics、Inhibitors和Target Protectors確定miRNA的功能。
miRNA的純化
高質(zhì)量miRNA純化
高質(zhì)量的總RNA(包括miRNA)的純化，是成功的miRNA定量實(shí)驗(yàn)的前提條件，因?yàn)橘|(zhì)量不佳的RNA會阻礙酶促反應(yīng)，且小RNA的低效純化會導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。為miRNA純化而推出的miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 確保您的實(shí)驗(yàn)有高質(zhì)量的RNA。miRNA產(chǎn)量優(yōu)于其他miRNA純化方法，如苯酚抽提和沉淀。如有必要，miRNA純化也可在QIAcube?或QIAsymphony? 儀器上自動開展(如需更多信息，請?jiān)L問http://www.qiagen.com/default.aspx)。
總RNA的純化或miRNA的富集
miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 可純化總RNA，包括~18 nt以上的RNA。另外，對于所有樣品類型，除包含嚴(yán)重降解RNA的樣品(如FFPE組織)和包含少量大RNA(如血清/血漿樣品)的樣品外，miRNeasy Kits可分別純化富含miRNA的組分(< ~200 nt)和總RNA組分(> ~200 nt)。利用miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 純化得到的RNA適合各種下游應(yīng)用，如northern blot分析、芯片分析及實(shí)時定量RT-PCR。在某些應(yīng)用(如一些芯片系統(tǒng))中，小RNA的富集可降低背景，但利用miScript miRNA PCR Arrays 和miScript Primer Assays 的分析則不需要。
從組織和細(xì)胞中高效純化
miRNeasy Mini、Micro和96 Kits 可從組織和細(xì)胞中高效純化RNA，即使所用的起始材料量很少。RNA可從各種組織和細(xì)胞中純化，包括難以裂解的組織。包括miRNA在內(nèi)的總RNA純化實(shí)現(xiàn)了miRNA與那些目標(biāo)mRNA、參照看家基因或其它目的mRNA表達(dá)水平的直接比較。
從血清或血漿中純化循環(huán)miRNA
循環(huán)miRNA可作為檢測不同癌癥及其他**(如糖尿病)的潛在生物標(biāo)志物。利用從血清或血漿中純化得到的RNA，研究已發(fā)現(xiàn)一些miRNA在一些癌癥中的獨(dú)特表達(dá)。miRNeasy Serum/ Plasma Kit 能夠從少量的血漿或血清中純化總RNA。miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control提供了一個合成的加標(biāo)對照，適用于研究血清或血漿樣品時的標(biāo)準(zhǔn)化。純化得到的RNA之后可用于miScript PCR System，以發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)志物。
從FFPE切片中獲得高純度RNA
交聯(lián)和片段化讓FFPE切片的核酸純化**挑戰(zhàn)性。miRNeasy FFPE Kit 提供了特殊的裂解和孵育條件，對RNA解交聯(lián)，并有效純化RNA，同時避免RNA的進(jìn)一步降解。為了去除痕量的小DNA片段，以免妨礙下游分析(如實(shí)時定量RT-PCR)，RNA經(jīng)過DNase 和DNase Booster Buffer 處理，此緩沖液優(yōu)化了DNase反應(yīng)。利用miRNeasy FFPE Kit 制備的總RNA隨后可用于miScript PCR System，以釋放寶貴的表達(dá)數(shù)據(jù)。
