各大公司還在不斷研發(fā)，加推新品，力求讓轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)更簡(jiǎn)便，轉(zhuǎn)染效率更高，毒性更低，或覆蓋過(guò)去未曾涉及的領(lǐng)域(如活體轉(zhuǎn)染)。那么，我們就來(lái)看看Qiagen公司帶來(lái)了哪些好東東。
FlexiTube sirna Premix 是典型的省時(shí)省力型試劑，它以單管形式提供了您感興趣基因的siRNA以及高效的轉(zhuǎn)染試劑，無(wú)需混合，即可直接用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染。而傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)需要先稀釋 siRNA，再與轉(zhuǎn)染試劑混合并孵育。相比之下，此預(yù)混液可節(jié)約大量的時(shí)間和勞力。同時(shí)，F(xiàn)lexiTube siRNA Premix的使用也減少了實(shí)驗(yàn)內(nèi)和實(shí)驗(yàn)間的差異，保證了不同實(shí)驗(yàn)間的高度一致性。
此外，F(xiàn)lexiTube siRNA Premix也不僅僅是簡(jiǎn)單的混合，其中試劑與siRNA的比率已預(yù)先優(yōu)化過(guò)，確保高的轉(zhuǎn)染效率和基因沉默。你無(wú)需優(yōu)化siRNA與試劑的比例，可快速啟動(dòng)RNAi 實(shí)驗(yàn)，避免了冗長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)優(yōu)化過(guò)程。目前QIAGEN提供了針對(duì)人類和小鼠基因的FlexiTube siRNA Premix。
FlexiTube siRNA Premix中包含的FlexiTube siRNA是利用HP OnGuard siRNA Design 設(shè)計(jì)的，確保其具備高特異性。siRNA的設(shè)計(jì)基于人工智能設(shè)計(jì)程序，并結(jié)合大量的RNAi實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。同時(shí)使用新的序列數(shù)據(jù)庫(kù)及**的同源性分析軟件對(duì) siRNA 的設(shè)計(jì)進(jìn)行檢測(cè)。
大家肯定關(guān)心轉(zhuǎn)染效率如何，當(dāng)然這也是因細(xì)胞而異的。至于難搞的原代細(xì)胞和懸浮細(xì)胞，你可以嘗試一下加大用量。反之，如果你還想降低siRNA的終濃度，當(dāng)然也可以，只需要使用更少量的FlexiTube siRNA Premix。例如，使用建議量的一半，這樣siRNA的終濃度即為12.5 nM。取決于不同的細(xì)胞類型，有時(shí)siRNA終濃度低至1 nM也能產(chǎn)生高效的基因沉默。
大家都清楚，省時(shí)省力的東西一般都不省錢(qián)，F(xiàn)lexiTube siRNA Premix當(dāng)然也不例外。如果是單獨(dú)的FlexiTube siRNA，1 nmol約為930元，而Premix的目錄價(jià)為1770元，其中含有0.75 nmol siRNA。當(dāng)然，也不能這么直接比較，畢竟你連轉(zhuǎn)染試劑的錢(qián)也省了。如果實(shí)驗(yàn)室可以承受的話，這確實(shí)是個(gè)省事的好選擇。
另外，QIAGEN還帶來(lái)了HiPerFect轉(zhuǎn)染試劑的高通量版本 – HiPerFect HTS Reagent，能夠高通量地轉(zhuǎn)染siRNA/miRNA，適合通路分析、**開(kāi)發(fā)及miRNA功能研究。對(duì)于高通量實(shí)驗(yàn)而言，操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠和經(jīng)濟(jì)實(shí)惠都很關(guān)鍵。HiPerFect HTS試劑能同時(shí)滿足這幾點(diǎn)。索取資料
HiPerFect HTS試劑提供了穩(wěn)定可靠的轉(zhuǎn)染，確保了高通量實(shí)驗(yàn)的一致性和可重復(fù)性。它的操作步驟也有所不同，目的是盡量減少耗材的使用，減少移液步驟，在節(jié)約資源和時(shí)間的同時(shí)也有利于標(biāo)準(zhǔn)化。
說(shuō)明書(shū)中提供了在96孔板和384孔板中反式轉(zhuǎn)染貼壁細(xì)胞的操作步驟。在操作過(guò)程中，細(xì)胞可在同**接種和轉(zhuǎn)染。具體過(guò)程是，siRNA先加入孔中，再加入HiPerFect HTS試劑，在復(fù)合物形成之后，將細(xì)胞加入孔中。
除了塑料耗材的節(jié)省之外，每次轉(zhuǎn)染只使用少量的轉(zhuǎn)染試劑，確保大的經(jīng)濟(jì)效益，同時(shí)也不會(huì)折損結(jié)果的可靠性。HiPerFect HTS試劑本身也有一些優(yōu)勢(shì)，比如批次間一致性高，且稀釋后的穩(wěn)定性高。這些性質(zhì)對(duì)于實(shí)際操作也蠻重要，例如，你可以在早上稀釋，然后用一整天，轉(zhuǎn)染效果也不會(huì)打折。
目前，HiPerFect HTS試劑已經(jīng)成功轉(zhuǎn)染了一些細(xì)胞系，除了常見(jiàn)的293、HeLa等細(xì)胞系外，HUVEC和NHDF等原代細(xì)胞也能成功轉(zhuǎn)染。
HiPerFect HTS試劑目前有三種規(guī)格。迷你版(0.1 ml)的試劑適合初實(shí)驗(yàn)，價(jià)格為560元，適用于4-10塊96孔板。而2×1 ml和6×1 ml的試劑分別為9600元和25200元。當(dāng)然，如果真的用量很大，那應(yīng)該會(huì)有一個(gè)不錯(cuò)的折扣。
