德國(guó)美天旎MACSelect?——轉(zhuǎn)染后的明智之選

光陰荏苒，歲月如梭，做實(shí)驗(yàn)的時(shí)光總是過(guò)得特別快。轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞篩選，動(dòng)輒幾個(gè)星期，多則數(shù)月，真是急得人直跳腳。MACSelect的登場(chǎng)，讓一切問(wèn)題都迎刃而解了。

德國(guó)美天旎公司推出的MACSelect?系統(tǒng)，是一種轉(zhuǎn)染細(xì)胞分選系統(tǒng)，可以磁性富集已轉(zhuǎn)染的哺乳動(dòng)物細(xì)胞。無(wú)論是原代細(xì)胞或難轉(zhuǎn)的細(xì)胞系，也不論是貼壁或懸浮細(xì)胞，在常規(guī)轉(zhuǎn)染后都能分選。高比例的陽(yáng)性細(xì)胞和小的非轉(zhuǎn)染細(xì)胞的背景，增加了下游的分析顯著性和可靠性。

無(wú)論你進(jìn)行功能基因分析、藥篩、報(bào)告基因檢測(cè)，還是RNAi，轉(zhuǎn)染都是必不可少的步驟。那么，試試MACSelect吧，3小時(shí)篩選出轉(zhuǎn)染細(xì)胞，花少的時(shí)間獲得大的結(jié)果!

與耗時(shí)的***篩選相比，使用MACSelect技術(shù)，僅需3小時(shí)就能挑選出轉(zhuǎn)染陽(yáng)性細(xì)胞。重復(fù)的MACSelect挑選，可得到穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系。溫柔的MACS磁珠極小，直徑僅有50 nm，對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性，不影響細(xì)胞功能，還能降解。篩選出的細(xì)胞能直接進(jìn)行功能研究或細(xì)胞培養(yǎng)。同時(shí)，你也無(wú)需改變轉(zhuǎn)染方法。只要加入MACSelect的篩選標(biāo)志，任何轉(zhuǎn)染方法：電轉(zhuǎn)、磷酸鈣、脂質(zhì)體或核轉(zhuǎn)染都OK。

MACSelect是一個(gè)聰明的系統(tǒng)。選擇標(biāo)志物共表達(dá)在細(xì)胞表面，已轉(zhuǎn)染的細(xì)胞可通過(guò)磁性標(biāo)記從未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中分選出來(lái)。所有的pMACS載體編碼的表面標(biāo)志物都刪除了胞內(nèi)domain。使用pMACS載體和表達(dá)載體的共轉(zhuǎn)是簡(jiǎn)單的 MACSelect系統(tǒng)使用方法。當(dāng)然，也可以把基因克隆到pMACS載體進(jìn)行單轉(zhuǎn)。

美天旎提供的篩選標(biāo)志有三種：CD4、H2-KK、LNGFR。MACSelect 4 系統(tǒng)使用修改的人CD4分子作為選擇標(biāo)志物。它適用于CD4陰性細(xì)胞系。MACSelect KK系統(tǒng)使用修改的小鼠MHC I分子H-2KK作為選擇標(biāo)志物。僅有極少的鼠系細(xì)胞表達(dá)H-2KK，因而其可用于幾乎任何哺乳動(dòng)物細(xì)胞。MACSelect LNGFR系統(tǒng)使用的人低親和度神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體(LNGFR)分子經(jīng)過(guò)修改。表達(dá)LNGFR分子的細(xì)胞有：**和外周神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞，骨髓成纖維細(xì)胞，濾泡樹(shù)突狀細(xì)胞和一些間充質(zhì)細(xì)胞。因此，載體也有常規(guī)和雙順?lè)醋觾深?lèi)。

幾個(gè)小時(shí)后，轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞就被MACSelect磁珠標(biāo)記上，并通過(guò)磁性作用在MACS的柱上進(jìn)行分離。如果是手動(dòng)操作，MS或LS柱加MACS分離器就行，如果是高通量的分析，autoMACS將是個(gè)不錯(cuò)的選擇。

MACSelect的步驟