一、穩(wěn)定性對(duì)分析測(cè)試誤差的影響
許多科技工作者經(jīng)常把基線漂移說(shuō)成穩(wěn)定性, 他們認(rèn)為基線漂移小就是穩(wěn)定性好, 其實(shí)這是不**的。因?yàn)? 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的穩(wěn)定性應(yīng)包括基線漂移( Baseline Drift ) 和光度重復(fù)性( Photomet ric Reproducibility ) 兩個(gè)方面。使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)或制造紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí), 都有一個(gè)很重要的原則或宗旨, 這就是儀器要穩(wěn)定可靠。如果一臺(tái)儀器的穩(wěn)定性差, 就不可能得到好的分析測(cè)試結(jié)果。儀器的穩(wěn)定性好壞, 是挑選紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)儀器或使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的關(guān)鍵問(wèn)題之一。不能只是單純的把基線漂移作為穩(wěn)定性, 真正的穩(wěn)定性好的含義, 必須是包括基線漂移和光度重復(fù)性。如果一臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的基線漂移不好,在整個(gè)分析測(cè)試過(guò)程中始終在漂移, 根本穩(wěn)定不下來(lái); 或重復(fù)性不好, 每次測(cè)試的結(jié)果都不能重復(fù), 這肯定不是好儀器。
二、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)穩(wěn)定性的測(cè)試方法
( 一) 基線漂移的測(cè)試方法
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)冷態(tài)開(kāi)機(jī)( 關(guān)機(jī)2h 后開(kāi)機(jī)) , 預(yù)熱2 h 后, 設(shè)置儀器的參數(shù)為: 試樣和參比比色皿都為空氣, 吸光度為0Abs , 光譜帶寬為2nm,掃描方式為時(shí)間掃描。連續(xù)測(cè)試1h , 取這1h 內(nèi), 大小值之差即是基線漂移。也有人取1h 內(nèi)漂移線的包羅線之中線的大小值之差作為基線漂移,這種作法是可以的。連續(xù)測(cè)試1h 是與國(guó)際接軌的測(cè)試方法, 然而有許多制造廠商往往采用10min 或30min 等的測(cè)試時(shí)間, 這是不對(duì)的。因?yàn)? 使用者作一個(gè)實(shí)驗(yàn), 在10min 內(nèi)還未做完, 儀器的基線已經(jīng)漂掉了, 這怎么能保證使用者的分析測(cè)試數(shù)據(jù)的可靠性呢? 30min 的測(cè)試時(shí)間也不科學(xué), 因?yàn)樵谧贤鈪^(qū)一般用氘燈, 它是一種氣體放電燈。從物理學(xué)或氣體發(fā)光的理論來(lái)講, 一般的氣體放電燈, 要在30min 左右其發(fā)光才能達(dá)到穩(wěn)定。10min 時(shí), 燈泡的發(fā)光也未達(dá)到佳值,何況還有其他很多因素決定了儀器還未到達(dá)測(cè)試穩(wěn)定性的時(shí)間。所以說(shuō)測(cè)試1h 才是正確的。
目前, 還有人在測(cè)試基線漂移時(shí), 光度單位設(shè)為透射比( % T ) , 這是可以的, 但沒(méi)有設(shè)置吸光度單位好。因?yàn)? 使用者一般多用吸光度( Abs) ,而不用或很少用透射比( % T ) 。并且, 國(guó)外的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)一般用吸光度( Abs) 來(lái)表示基線漂移, 將透射比( %T ) 換算吸光度( Abs) 比較麻煩。
( 二) 光度重復(fù)性的測(cè)試方法
光度重復(fù)性的測(cè)試方法有幾種: 其一是儀器冷態(tài)開(kāi)機(jī), 預(yù)熱0. 5h 后, 由同一操作者, 用某種實(shí)際樣品, 對(duì)儀器的光度值( 吸光度或透射比均可) 進(jìn)行測(cè)定。一般是連續(xù)測(cè)量3 次, 取測(cè)量值中的大小值之差作為光度重復(fù)性,也有人測(cè)量5 次或7 次。我國(guó)的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和我國(guó)的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)計(jì)量檢定規(guī)程, 規(guī)定測(cè)試3 次。光度重復(fù)性的測(cè)試方法也可用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)( 溶液) 或標(biāo)準(zhǔn)片來(lái)進(jìn)行。具體操作方法是儀器冷態(tài)開(kāi)機(jī), 預(yù)熱0. 5h 后, 在用標(biāo)準(zhǔn)片來(lái)測(cè)試時(shí), 參考為空氣。在用標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)試時(shí), 參考為溶劑或空氣均可, 設(shè)置很小的光度單位( 一般設(shè)為吸光度單位) , 光譜帶寬為2nm, 對(duì)標(biāo)準(zhǔn)片或標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)試。一般測(cè)量3～7 次。其測(cè)量值的大與小值之差就是光度重復(fù)性。
從我國(guó)目前的實(shí)際情況看, 不少使用分析儀器的人員常常不熟悉儀器的結(jié)構(gòu), 不甚了解或不了解儀器的技術(shù)指標(biāo)對(duì)分析測(cè)試誤差的影響, 因此, 往往用不好儀器, 或者說(shuō)不能把儀器用到佳狀態(tài), 大限度地發(fā)揮儀器的作用。以致有很多使用不合理之處, 如“ 大材小用”, **的分析儀器當(dāng)作低檔常規(guī)儀器使用, 物非其用, 把紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)當(dāng)作一般可見(jiàn)分光光度計(jì)使用。這實(shí)際上是一種極大的浪費(fèi)。此專題的目的, 就是希望更多的通過(guò)專題能對(duì)在自己的實(shí)際工作中用好紫外可見(jiàn)分光光度計(jì), 大限度地發(fā)揮儀器的作用有所幫助，同時(shí)，希望儀器制造者能通過(guò)專題改進(jìn)自己的技術(shù)，也希望更多的人通過(guò)這個(gè)專題了解到紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的相關(guān)知識(shí)。
