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三步就能完成轉(zhuǎn)染

Neon? 轉(zhuǎn)染技術(shù)可高效地將核酸導(dǎo)入所有測試過的哺乳動物細胞類型,包括難轉(zhuǎn)染的細胞、原代細胞和干細胞。這個開放而靈活的核酸導(dǎo)入系統(tǒng)包含了一個小型的臺式電穿孔儀、一個電子移液器吸頭架、**的電子移液器吸頭,以及專用的試劑。

Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的優(yōu)勢:

高效——在多數(shù)細胞類型中獲得超過75%的轉(zhuǎn)染效率,包括難轉(zhuǎn)染的細胞,如原代細胞和干細胞(表1)

靈活——每次可輕松轉(zhuǎn)染2×10 4----6×10 6個細胞

簡單——通用的試劑盒適用于所有細胞類型

多功能——開放的系統(tǒng),可輕松調(diào)整轉(zhuǎn)染參數(shù)

簡單易用的三步操作

即插即用

轉(zhuǎn)染步驟簡單到不能再簡單了(圖1)。(1) 將細胞和質(zhì)?;旌衔镂隢eon? 移液器吸頭中,(2) 插入到移液器吸頭架上,并按“開始”。(3) 然后,只需將轉(zhuǎn)染過的細胞加入你的培養(yǎng)容器中。既不需要將樣品加入或移出電擊杯,也不需要加蓋和開蓋。轉(zhuǎn)染發(fā)生在Neon? 移液器吸頭中。

三步就能完成轉(zhuǎn)染



圖1-Neon? 系統(tǒng)使用簡單的3步轉(zhuǎn)染程序。

新穎的移液器吸頭(電反應(yīng)室)

與傳統(tǒng)的電擊杯一類的電穿孔反應(yīng)室不同,Neon? 系統(tǒng)利用了生物兼容的**移液管反應(yīng)室,從而產(chǎn)生更均勻的電場(圖2)。這種設(shè)計能更好地維持生理條件,與傳統(tǒng)的電穿孔相比,細胞存活率非常高。

三步就能完成轉(zhuǎn)染



圖2. 標準的電擊杯反應(yīng)室與Neon? 移液器吸頭的比較。(A) 標準的電擊杯。(B) Neon? 移液器吸頭。在我們?nèi)碌囊埔浩魑^設(shè)計中,電極的設(shè)計已表明能產(chǎn)生能均勻的電場。終結(jié)果是細胞毒性更小,轉(zhuǎn)染效率更高。

杰出的效率

Neon? 轉(zhuǎn)染技術(shù)專為操作簡單易用的高效率基因?qū)攵O(shè)計(圖3)。經(jīng)過一次防故障的優(yōu)化實驗,即可在任何細胞類型中將導(dǎo)入效率大化,同時將毒性小化(表1)(在毒性小化的條件下獲得大的導(dǎo)入效率)。利用Neon? 細胞數(shù)據(jù)庫中的驗證步驟作為起點,來優(yōu)化你的實驗。

三步就能完成轉(zhuǎn)染

圖3. 利用Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)來高效轉(zhuǎn)染Jurkat細胞。(A) 利用Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)轉(zhuǎn)染Jurkat細胞24小時后,編碼EGFP的報告載體的細胞內(nèi)吸收。(B) A圖的對應(yīng)熒光圖像。

表1-Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)成功轉(zhuǎn)染的細胞系。對于成功轉(zhuǎn)染過的細胞系的完整列表、操作步驟和更多的參考文獻資料,請訪問www.invitrogen.com/neon。


細胞系 細胞類型 轉(zhuǎn)染效率* (%) 活細胞 (%)
原代星形膠質(zhì)細胞 腦神經(jīng)元 76 88
原代樹突狀細胞 血液 50 70
Jurkat T細胞白血病 94 97
KG-1a 血液 76 83
原代小鼠胚胎成纖維細胞 胚胎 80 75
小鼠胚胎干細胞 胚胎 88 96
* 轉(zhuǎn)染效率是根據(jù)活細胞和死細胞的全部群體來計算的。



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