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Clontech轉(zhuǎn)染試劑盤點

Clontech,曾經(jīng)是華人的驕傲,其開發(fā)的產(chǎn)品曾多次獲得R&D 100大獎。雖說幾經(jīng)沉浮,但如今TaKaRa旗下的Clontech仍在基因表達領(lǐng)域默默耕耘,不斷開發(fā)新產(chǎn)品。對于從事基因表達的研究人員來說,Smart Race、酵母雙雜交系統(tǒng)、慢病毒與腺病毒載體、多色熒光蛋白載體這些產(chǎn)品大家都不會陌生。近幾年,Clontech也推出了不少優(yōu)良的轉(zhuǎn)染試劑,包括干細胞專用的轉(zhuǎn)染試劑。

質(zhì)粒轉(zhuǎn)染

為了提高轉(zhuǎn)染效率,我們往往會增加質(zhì)粒dna和轉(zhuǎn)染試劑的量,但不幸的是,大部分轉(zhuǎn)染試劑都會傷害細胞。然而,出身名門的Xfect轉(zhuǎn)染試劑卻是與眾不同。當時,麻省理工大學的科學家篩選了2300多種候選聚合物,鑒定出轉(zhuǎn)染效果出色、而細胞毒性極低的聚合物。這就是Xfect的前身。這種新型的可生物降解的納米顆粒在實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染的同時,也不會殺死您的細胞。

Xfect轉(zhuǎn)染試劑適用于大部分細胞類型。經(jīng)過測試,它在一些常用的細胞系,如HeLa、HEK-293、CHO-K1和HT1080細胞中都有著80%以上的轉(zhuǎn)染效率。對于難轉(zhuǎn)染的細胞,如Jurkat細胞,它比競爭產(chǎn)品的轉(zhuǎn)染效率高出40倍。此外,Xfect毒性也較低。以往,由于轉(zhuǎn)染試劑不能耐受血清,轉(zhuǎn)染過程中還得換成無血清培養(yǎng)基,甚是麻煩。Xfect則不受血清的影響,轉(zhuǎn)染全程都可以有血清的存在,使用更方便。Xfect的價格為2001元/100次,注意,這里的100次是以6孔板的孔計算的,如果換算成24孔板,大約則是500次。與**的轉(zhuǎn)染試劑相比,性價比頗高。(價格僅供參考)

Xfect mESC轉(zhuǎn)染試劑則是專為小鼠胚胎干細胞的轉(zhuǎn)染而設(shè)計的。胚胎干細胞的研究持續(xù)升溫,但轉(zhuǎn)染始終是個令人頭疼的問題。胚胎干細胞似乎“百毒不侵”,抗拒著外來的DNA。Xfect mESC則是從2300多個候選者中脫穎而出的佼佼者,在干細胞轉(zhuǎn)染上有著不俗的表現(xiàn)。經(jīng)過驗證,它在小鼠胚胎干細胞系E14TG2A 和D3中的轉(zhuǎn)染效率均高于市場上暢銷的其他試劑。Xfect mESC的價格為2375元/100次。

之后,Clontech又為人成體干細胞研究推出了Xfect? Adult Stem Cell轉(zhuǎn)染試劑。它的配方經(jīng)過修改,能在人間充質(zhì)干細胞和脂肪來源的干細胞中實現(xiàn)更高的轉(zhuǎn)染效率。據(jù)介紹,它可以67%的效率轉(zhuǎn)染人間充質(zhì)干細胞(hMSC),而人脂肪來源干細胞(hADSC)的轉(zhuǎn)染效率更高達99%。Xfect Adult Stem Cell價格基本同上,為2376元/100次。

sirna的轉(zhuǎn)染

有些小RNA的轉(zhuǎn)染試劑初是為質(zhì)粒導入而設(shè)計的,之后略加修改,便用于小RNA的轉(zhuǎn)染。Xfect siRNA轉(zhuǎn)染試劑卻并不是這樣一款萬能膏藥。它是為siRNA的導入而特別設(shè)計的,能與雙鏈寡核苷酸(如siRNA)高效結(jié)合。與上面的Xfect系列產(chǎn)品相似,它在實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染的同時也不會殺死您寶貴的細胞。毒性低,是這種納米顆粒的特點。

這款試劑還有個特點,無需優(yōu)化。專家為你帶來了佳的方案。對于24孔板,您應當使用30 pmole siRNA和4 μl轉(zhuǎn)染試劑。這也意味著您再也不用去反復嘗試不同比例的siRNA和轉(zhuǎn)染試劑,省時省力,還省樣品。轉(zhuǎn)染過程也非常簡單。您所需的都在試劑盒里,不需要OptiMEM,轉(zhuǎn)染過程可在血清存在時開展。

Xfect siRNA轉(zhuǎn)染試劑的規(guī)格為1000次,這是對12孔板而言。若是24孔板,大約可用2000次,考慮到2678元的價格,真是價格實惠量又足。有些人也許要說,包裝太大了,我可用不完。Clontech也考慮到這一點,非常貼心地將試劑盒分為4×250的包裝。這樣,幾位就可以拼單購買了。若是一個大實驗室購買,也可每人分一管,不怕太多人使用,導致試劑被污染。

蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染

與傳統(tǒng)的基因表達相比,蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染非??焖?,因為它繞過了轉(zhuǎn)錄和翻譯等過程。它還避免了DNA隨機整合到靶細胞的基因組中,造成突變的風險。當然,前提是您手頭上有目的蛋白。

Xfect Protein 轉(zhuǎn)染試劑是一種經(jīng)過修飾的肽段,其特殊的氨基酸組成使它能夠與目標蛋白相互作用,而肽段本身可穿透細胞膜,所以能協(xié)助目標蛋白跨越細胞膜屏障進入細胞內(nèi)。使用方法極為簡單,只要將目的蛋白與 Xfect Protein轉(zhuǎn)染試劑混合30分鐘后,再與細胞混合 2 小時后,您就可以測定蛋白質(zhì)活性。

Xfect Protein 轉(zhuǎn)染試劑并非脂質(zhì)體,毒性超低;蛋白轉(zhuǎn)染效率高,就連難搞的干細胞或血細胞也能搞定。Xfect Protein目前有兩種規(guī)格,30次和100次,價格分別為3354元/30次,7178元/100次。

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