由于RNAi實驗技術(shù)的推廣和應(yīng)用，人們對特定基因“敲除”或“沉默”變得越來越簡單，研究也越來越多。在體外培養(yǎng)細胞中進行RNAi實驗已經(jīng)比較容易，人們只需要選擇合適的培養(yǎng)細胞系，用特定的核酸和轉(zhuǎn)染試劑即可完成相應(yīng)的轉(zhuǎn)染。隨著研究的深入，人們需要將研究從經(jīng)過人工改造的細胞和模擬的簡單的人工培養(yǎng)環(huán)境，轉(zhuǎn)向自然的細胞和體內(nèi)自然復(fù)雜的環(huán)境，揭示更符合真實自然的**和生命秘密，并向應(yīng)用更進一步。
但以前動物實驗往往讓人望而卻步，主要的原因是沒有簡單可靠的方法進行，花費的時間和周期長，達不到預(yù)期的效果。以前人們?nèi)绻朐趧游矬w內(nèi)進行基因轉(zhuǎn)移實驗，主要是通過腺病毒或慢病毒的方法進行。病毒感染的方法主要過程是，構(gòu)建相應(yīng)的病毒載體，然后在細胞中進行病毒包裝。通常情況下包裝一次病毒至少幾個月，花費幾萬到十幾萬，如果實驗重復(fù)，這個時間和花費就更大了。病毒感染的方法，由于是病毒主動侵襲，一般認為效率高。但在實際應(yīng)用過程中，由于包裝過程復(fù)雜，任何一個環(huán)節(jié)出錯，都有可能導(dǎo)致包裝失敗或包裝出來的病毒效率低下。此時，由于環(huán)節(jié)眾多，往往不易查找原因。對采用病毒包裝進行RNAi實驗來說，由于需要選擇具有佳干擾效率的核酸序列，往往需要不斷調(diào)整，如果每次調(diào)整都需要重新包裝病毒來說，那么效率就太低下了，同時花費也非常大。而且，病毒還存在對研究者和環(huán)境的生物**的問題。
那么有沒有像體外細胞轉(zhuǎn)染一樣簡單易用的方法呢，只需要花幾百元合成小片斷RNA，然后用轉(zhuǎn)染試劑就完成轉(zhuǎn)染。很多研究者已經(jīng)進行過嘗試，他們發(fā)現(xiàn)，如果簡單用體外轉(zhuǎn)染試劑進行轉(zhuǎn)染，會面臨幾個問題。首先是體外培養(yǎng)基和動物體內(nèi)的體液系統(tǒng)是完全不同的，一些適合體外轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染試劑，如脂質(zhì)系統(tǒng)，是很容易被體內(nèi)的體液系統(tǒng)所破壞和****的。其次是一些轉(zhuǎn)染試劑在體外進行時，毒性已比較明顯，如果進行體內(nèi)轉(zhuǎn)染，那么動物發(fā)生炎癥反應(yīng)的比例也會很高，這樣不僅不能產(chǎn)生良好的轉(zhuǎn)染效果，而且干擾了實驗效果，甚至導(dǎo)致動物的死亡。所以，一些普通的體外轉(zhuǎn)染試劑是不支持進行體內(nèi)轉(zhuǎn)染的。
如果需要在動物體內(nèi)采用轉(zhuǎn)染試劑進行轉(zhuǎn)染，這要求：1.轉(zhuǎn)染試劑能耐受體內(nèi)復(fù)雜的環(huán)境，不會被體內(nèi)**系統(tǒng)識別**，產(chǎn)生**反應(yīng)。2.轉(zhuǎn)染試劑效率要高，毒性要低，眾所周知，原代細胞比傳代細胞要難轉(zhuǎn)染得多，而體內(nèi)轉(zhuǎn)染又要比體外轉(zhuǎn)染要難。所以轉(zhuǎn)染的效率一定要高，同時，毒性要低，這樣才能產(chǎn)生顯著的轉(zhuǎn)染效果，以利于實驗觀察。
英格恩生物近期推出的動物體內(nèi)專用轉(zhuǎn)染試劑Entranster?-in vivo，非脂質(zhì)體，采用納米技術(shù)合成，能耐受體內(nèi)復(fù)雜的環(huán)境，不產(chǎn)生**反應(yīng)。而且轉(zhuǎn)染效率高，方法簡單。只需要將核酸和轉(zhuǎn)染試劑稀釋混合，無需過濾，即可直接注射動物進行實驗。Entranster?-in vivo的價格也非常合適，只相當(dāng)普通的體外轉(zhuǎn)染試劑的價格。對需要動物實驗，經(jīng)費、時間和實驗條件有限的實驗室來說，無疑是好消息。
Entranster?-in vivo動物體外轉(zhuǎn)染試劑雖然推出時間不長，但由于其方法、價格和效果上的突出優(yōu)點，已被許多實驗室采用，并有相當(dāng)?shù)膽?yīng)用文獻發(fā)表。
Entranster?-in vivo的詳細介紹請見：www.engreen.com.cn
滬公網(wǎng)安備 31011002002624號
